O protozoário Toxoplasma gondii é um parasita intracelular com ampla distribuição geográfica e alta prevalência sorológica mundial. Estima-se que um terço da população humana mundial esteja cronicamente infectada por T. gondii. Em Campos dos Goytacazes a toxoplasmose é endêmica e atinge principalmente a população de menor poder aquisitivo. A ingestão de cistos teciduais presentes em carnes cruas ou mal cozidas e a ingestão de água ou alimentos contaminados com oocistos esporulados de T. gondii consistem nas vias mais importantes de transmissão da toxoplasmose humana em termos epidemiológicos. No entanto, não é possível determinar a via de infecção (oocistos ou cistos teciduais) por meio de testes sorológicos convencionais. Nesse sentido, este trabalho visa avaliar a contaminação ambiental por oocistos de T. gondii em Campos dos Goytacazes, por meio da utilização de método sorológico específico para esporozoítos do parasito (TgERP) e da caracterização genética de isolados de aves peridomiciliares em associação com o grau de vulnerabilidade de aquífero da região. A soroprevalência da toxoplasmose estimada na população de estudo pelo ELISA convencional foi de 65,9% e de 62,9% no ELISA específico para oocistos (ELISA TgERP). Estes resultados dimensionam a importância da transmissão por oocistos de T. gondii nessa região. Foram obtidos 23 isolados de T. gondii das aves pelo bioensaio em camundongos. A caracterização genotípica de T. gondii pela PCR/RFLP permitiu a identificação de 11 genótipos, sendo dois isolados novos, ainda não descritos. Prevalência mais elevada da toxoplasmose humana e animal foi observada nas áreas de alta e extrema vulnerabilidade de aquíferos. A correlação entre a vulnerabilidade de aquíferos e a prevalência da toxoplasmose animal e humana estimada pelo ELISA convencional e pelo ELISA anti- antígeno de esporozoítos aponta para a possibilidade de re-infecções e revela-se estratégia de valor para estudo de relação da infecção humana e animal versus contaminação ambiental por oocistos de T. gondii. Palavras chaves: Toxoplasma gondii, sorologia, hidrogeologia e geomedicina